一级毛片视频在线观看-一级毛片视频免费-一级毛片视频播放-一级毛片看真人在线视频-国产高清在线精品一区a-国产高清在线精品一区二区

拉薩專業團隊談PCR擴增實驗室建設方案與規劃設計

admin 2020-05-15 14:30:42 閱讀


PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶(Enzyme)鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。
開展PCR實驗室應具備的條件
1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗(experiment)室;
由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到了廣泛應用。
2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗(experiment)室設置要求;
熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析(Analyse)軟件,構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統。
3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證;
4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業務培訓并取得合格證書;
PCR實驗室內工作人員必須參加由國家衛生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓班,并持證上崗。PCR實驗室通過驗收,實驗室至少必須應有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序(procedure)(SOP)、建立系列質量管理文件等,確保實驗室日常運行符合國家衛生部的要求,確保檢測結果準確、確保實驗室衛生安全,確保實驗室長期穩定(解釋:穩固安定;沒有變動)運行
5、必須在無菌(意思:沒有活菌)無塵環境下進行操作
下面介紹如何建立PCR實驗室
1、建立樣品準備區
這個區域專門用作樣品的準備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時應該采取預防措施(指針對問題的解決辦法):
PCR產物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。
組織培養物、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理,以根據應用的需要提取DNA或RNA。
用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。
DNA樣品應該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作,以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。
大體積樣品應該用單獨包裝的無菌(意思:沒有活菌)一次性移液管吸取。
管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產生,而且管子不能用力崩開,這樣會產生氣溶膠。
任何時候都應該穿實驗(experiment)服和帶手套,手套要經常更換,尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用于樣品準備間,經常清洗。
2、樣品準備和RNA-PCRRNA-PCR的額外(extra)步驟(procedure)需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會?;瘜W實驗室提供化學實驗條件及其進行科學探究的重要場所。其內有大量的儀器:鐵架臺、石棉網、酒精燈等實驗工具。通常會配有化學藥品柜,藥柜里面有常用的化學藥品,比如:五水硫酸銅(CuSO4·5H2O,即膽礬),氫氧化鈉溶液,石灰石,鹽酸等。為了避免這一問題,反轉錄一步可以在樣品準備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。
3、建立前PCR區。生物實驗P2室主要用于初級衛生服務、診斷和研究,其實驗對象的危害等級為Ⅱ級(中等個體危害,有限群體危害),具體定義為“能引起人類 或動物發病,但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環境不會引起嚴重危害的病源體。實驗室感染不導致嚴重疾病,具備有效治療和 預防措施,并且傳播風險有限”。
該去專門用于準備各種反應,這個區域必須保持干凈,而且沒有來自克隆和樣品準備的污染?;瘜W實驗室提供化學實驗條件及其進行科學探究的重要場所。其內有大量的儀器:鐵架臺、石棉網、酒精燈等實驗工具。通常會配有化學藥品柜,藥柜里面有常用的化學藥品,比如:五水硫酸銅(CuSO4·5H2O,即膽礬),氫氧化鈉溶液,石灰石,鹽酸等。前PCR區必須要有試劑和準備,特別是專門用于前PCR區的正壓活塞(piston)式移液管。
4、PCR實驗室試劑的操作。
所用的所有溶液都應該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的-新鮮蒸餾(still)的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高壓滅菌(fungus)。
在20到25貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑,在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。
所用試劑都應該以大體積配制,實驗一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。
所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。
新配制的試劑在用于準備新的標本之前應該加以檢驗。
樣品準備和前PCR區所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。
5、在前PCR區建立PCR混合物。
可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20或4,在實驗(experiment)室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。
如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟,可以考慮(consider)分裝保存夠一天的PCR成分。
作為一個規則,應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證(Experimental)你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。
陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染,陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。
當做陽性對照時,有兩個理由決定了應該使用最少數量的核酸。
由于必須有對照反應,對照模板的特點應該予以考慮。
6、控制(control)污染的方法。
已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的污染—使用UNG,這一技術能有效地消除由PCR產物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線(Ultraviolet rays),這種方法不能完全消除污染問題,但可以將污染降低幾個數量級。
7、后PCR區PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數據,應該留出一個專門用于反應后處理樣品的地方。后PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的,決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用于任何前PCR活動。
    x
    手機
    電話
    微信
    QQ
    99热精品在线| 亚洲爆爽| 国产a毛片| 青青久热| 亚久久伊人精品青青草原2020| 国产美女在线一区二区三区| 亚洲天堂免费| 久久久久久久久综合影视网| 日韩免费在线| 可以免费看毛片的网站| 久久久久久久久综合影视网| 国产精品免费久久| 尤物视频网站在线| 香蕉视频亚洲一级| 欧美激情在线精品video| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 人人干人人插| 欧美大片一区| 香蕉视频久久| 国产精品免费久久| 日韩欧美一二三区| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 色综合久久天天综合观看| 日韩av片免费播放| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 亚洲精品影院久久久久久| 九九干| 黄色短视屏| 久久国产精品永久免费网站| 香蕉视频亚洲一级| 国产高清在线精品一区a| 尤物视频网站在线| 九九精品久久久久久久久| 天天做人人爱夜夜爽2020| 夜夜操网| a级毛片免费观看网站| 成人在激情在线视频| 国产不卡精品一区二区三区| 日韩av片免费播放| 国产91精品系列在线观看| 国产美女在线一区二区三区| 久久国产精品永久免费网站| 欧美电影免费| 久久国产精品永久免费网站| 国产精品1024在线永久免费| 精品久久久久久影院免费| 在线观看导航| 精品国产三级a| 亚飞与亚基在线观看| 黄色免费三级| 国产不卡在线观看视频| 国产成人啪精品| 日韩男人天堂| 国产韩国精品一区二区三区| 亚洲精品中文字幕久久久久久| 精品久久久久久综合网| 欧美a级片视频| 日韩中文字幕在线亚洲一区| 国产成人精品影视| 国产一区二区精品久| 色综合久久天天综线观看| 黄色短视屏| 国产视频一区二区在线观看| 91麻豆tv| 日韩在线观看网站| 午夜激情视频在线播放| 日日日夜夜操| 精品国产三级a| 美女免费精品视频在线观看| 黄视频网站免费看| 99久久视频| 99热精品在线| 尤物视频网站在线| 精品国产亚一区二区三区| 免费毛片基地| 九九久久99| 九九久久99| 99久久精品国产高清一区二区| 久久久久久久久综合影视网| 亚洲第一色在线| 国产91丝袜在线播放0| 国产91丝袜在线播放0| 99久久精品国产高清一区二区| 成人免费高清视频| 成人免费高清视频| 一级女性全黄久久生活片| 麻豆污视频| 国产原创视频在线| 沈樵在线观看福利| 你懂的日韩| 可以免费在线看黄的网站| 亚飞与亚基在线观看| 九九精品在线| 日韩欧美一二三区| 欧美日本免费| 免费国产在线观看| 久久久成人网| 精品视频在线观看免费| 精品视频在线观看免费| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 欧美激情一区二区三区在线播放 | 精品国产亚一区二区三区| 成人免费观看网欧美片| 成人a大片在线观看| a级黄色毛片免费播放视频| 久久精品欧美一区二区| 日韩在线观看视频免费| 日本在线播放一区| 黄视频网站在线看| 精品国产亚洲一区二区三区| 一a一级片| 精品视频在线观看免费| 天天色成人网| 亚洲精品永久一区| 免费国产在线观看| 99久久精品国产高清一区二区| 日韩字幕在线| 精品视频在线观看免费| 国产精品1024在线永久免费| 成人免费观看男女羞羞视频| 久久99青青久久99久久| 尤物视频网站在线| a级毛片免费观看网站| 国产原创视频在线| 天天做日日爱夜夜爽| 成人高清视频在线观看| 亚洲精品久久久中文字| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 久久国产一久久高清| 日韩avdvd| 欧美激情一区二区三区在线播放 | 一级女人毛片人一女人| 欧美另类videosbestsex高清| 国产激情一区二区三区| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 亚洲精品中文字幕久久久久久| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 亚洲精品久久久中文字| 毛片高清| 日韩在线观看网站| 日韩在线观看网站| 美女被草网站| 香蕉视频亚洲一级| 精品视频一区二区| 欧美国产日韩一区二区三区| 久久久久久久久综合影视网| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 日韩欧美一二三区| 国产a毛片| 亚洲爆爽| 999久久狠狠免费精品| 毛片高清| 久久99青青久久99久久| 精品久久久久久影院免费| 国产视频一区在线| 日本特黄特色aaa大片免费| 久久久成人网| 天天色成人网| 亚洲第一色在线| 日韩免费在线| 午夜欧美成人久久久久久| 美女免费精品视频在线观看| 99热精品在线| 国产伦精品一区二区三区在线观看 | 精品视频一区二区三区免费| 成人a级高清视频在线观看| 日韩男人天堂| 国产视频一区二区在线观看| 国产伦精品一区二区三区在线观看 | 天天做人人爱夜夜爽2020| 二级特黄绝大片免费视频大片| a级黄色毛片免费播放视频| 日韩中文字幕在线播放| 韩国三级视频网站| 国产成人精品影视| 一级片免费在线观看视频| 天天做人人爱夜夜爽2020| 成人a大片在线观看| 日日夜夜婷婷| 国产成人女人在线视频观看| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 中文字幕一区二区三区精彩视频| 天天做日日爱夜夜爽| 亚洲精品影院久久久久久| 午夜欧美成人久久久久久| 国产一区二区精品久| 欧美另类videosbestsex高清| 免费一级片在线| 精品视频在线观看免费| 国产极品白嫩美女在线观看看| 你懂的日韩| 亚洲第一页乱| 亚洲 激情| 日韩欧美一二三区| 午夜激情视频在线播放| 韩国三级视频网站| 久久精品店| 欧美a级片视频| 久久99青青久久99久久| 日韩一级黄色片|